GB/T 23499-2009 食品中残留过氧化氢的测定方法检测标准

　　1.范围
　　本标准规定了食品中残留过氧化氢的测定方法。
　　本标准适用于食品中残留过多化氢的测定。碘量法定量检出限为3mg/kg;钛盐比色法定量检出限为1.6mg/kg,定性检出限为0.5mg/kg。
　　2.规范性引用文件
　　下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用于本标准。
　　GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备
　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-2008,ISO 3695:1987,MOD)
　　3.碘量法
　　3.1 原理
　　食品中的强氧化物在稀硫酸中使碘化钾氧化，产生定量的碘，生成的碘以淀粉作指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定得到强氧化物总量。加入过氧化氢酶分解去除试样中的过氧化氢，用硫代硫酸钠标准溶液滴定去除过氧化氢后的其他氧化物含量。2次滴定结果之差可计算得到样品中过氧化氢的含量。
　　3.2 试剂与材料
　　除另有说明外，所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的三级水。
　　3.2.1 0.1mol/L硫代硫酸钠标准标准储备液：按GB/T 601 规定的方法配制和标定。
　　3.2.2 0.0020mol/L硫代硫酸钠标准使用液：临用时用标准储备液稀释。
　　3.2.3 淀粉指示剂(10g/L):称取可溶性淀粉0.50g,加少许水,调成糊状，倒入50mL沸水中调匀，煮沸。临用时现配。
　　3.2.4 碘化钾溶液(100g/l):称取10.0g碘化钾，加水溶解，定容至100mL，贮于棕色瓶中。临用时现配。
　　3.2.5 10%稀硫酸(质量浓度)：量取60mL硫酸,缓缓注入700mL水中,冷却,稀释至1000mL。
　　3.2.6 3%钼酸铵溶液:称取3.00g钼酸铵,加100mL水溶解。
　　3.2.7 0.1%过氧化氢酶溶液：称量0.10g过氧化氢酶(单位活力大于200000U/mL),用100mL蒸馏水分多次将其溶解,冷藏可保存两个月。
　　3.2.8 亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O],用水溶解,并稀释至1000mL。
　　3.2.9 乙酸锌溶液:称取220.0g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O],加30mL冰乙酸,用水溶解,稀释至1000mL。
　　3.2.10 活性炭:将100g活性炭加至750mL 1mol/L盐酸中,回流1h～2h,过滤,用水洗数次,至滤液中无铁离子(Fe3+)为止,然后置于110℃烘箱中烘干。
　　检验铁离子方法：利用普鲁士蓝反应,将20g/L亚铁氰化钾与1%盐酸等量混合,将上述洗出滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。
　　3.3 仪器和设备
　　3.3.1 电子天平(感量0.01g)。
　　3.3.2 高速捣碎机。
　　3.4 样品处理
　　3.4.1 固体样品
　　称取粉碎均匀的试样10g(*到0.01g),加适量水溶解,转移入100mL容量瓶中,对蛋白质、脂肪含量较高的样品可加入乙酸锌溶液5mL,亚铁氰化钾溶液5mL,加水定容至刻度,摇匀,浸泡30min,用滤纸过滤,滤液作为试样液备用。
　　3,4.2 液体样品
　　吸取25g(*到0.01g)试样于100mL容量瓶中,对蛋白质、肪含量较高的样品可加入乙酸锌溶液5mL,亚铁氰化悍溶液5mL,加水定容至刻度,摇匀,用滤纸过滤,滤液作为试样液备用。
　　3.4.3 如样品滤液有颜色,加入1g活性炭,振摇1min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液待用。
　　3.5 测定
　　3.5.1 试样测定
　　分别吸取滤液25.0mL,置于A、B两个250mL碘量瓶中,A瓶中加入0.1%过氧化氢酶溶液(3,2,7)0.5mL,混匀,放置10min(放置过程中摇动数次)。在A、B两瓶中各加入10%硫酸5.0mL、碘化钾溶液5.0m1,3%钼酸铵3滴,混匀,置暗处放置10min,各加水50mL,分别用硫代硫酸钠标准溶液(3,2.2)滴定,待滴至微黄色时,加淀粉指示剂0.5mL,继续滴至蓝色消失,分别记录A、B两瓶消耗硫代硫酸钠标准溶液的毫升数。
　　3.5.2 结果计算
　　试样中过氧化氢的含量式(1)进行计算：
　　X=[(VB-VA)×c×B×34.02]/m×1000…………(1)
　　X——样品中过氧化氢的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);
　　VA——A瓶中消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
　　VB——B瓶中消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
　　c——硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);
　　m——试样质量,单位为克(g);
　　B—一样品稀释倍数;
　　34.02——与1.00mL硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3)=1.000mol/L]相当的过氧化氢的质量,单位为毫克(mg)。
　　计算结果保留三位有效数字。
　　3.6 允许差
　　在重复性条件下获得的两次独立测定结果的*差值不得超过算术平均值的10%。
　　4.钛盐比色法
　　4.1 原理
　　过氧化氢在酸性溶液中,与钛离子生成稳定的橙色络合物,在430nm下,吸光度与样品中过氧化氢含量成正比,用比色法测定样品中过氧化氢的含量。
　　4.2 试剂与材料
　　除另有说明外,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的三级水。
　　4.2.1 高锰酸钾标准溶液[c(1/5KMnO4)=0.100mol/L按GB/T 601规定的方法配制和标定。