NY/T 1846-2010 食用菌菌种检测标准

　　1 范围
　　本标准规定了各类食用菌菌种质量的检验内容和方法以及抽样、判定规则等要求。
　　本标准适用于各类食用菌各级菌种质量的检验。
　　2 规范性引用文件
　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
　　GB/T 191 包装储运图示标志(GB/T 191-2008 ISO 780:1997，MOD)
　　GB/T 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂
　　GB 19169 黑木耳菌种
　　GB 19170 香菇菌种
　　GB 19171 双孢蘑菇菌种
　　GB 19172 平菇菌种
　　GB/T 23599 草菇菌种
　　NY/T 528-2002 食用菌菌种生产技术规程
　　NY 862 杏鲍菇和白灵菇菌种
　　NY/T 1097 食用菌菌种真实性鉴定 酯酶同工酶电泳法
　　NY/T 1730 食用菌菌种真实性鉴定 ISSR法
　　NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求
　　NY/T 1743 食用菌菌种真实性鉴定 RAPD法
　　NY/T 1845-2010 食用菌菌种区别性鉴定 拮抗反应
　　3 术语和定义
　　下列术语和定义适用于本标准。
　　3.1 送检样品 submitted sample
　　送到菌种检验机构待检验的、达到规定数量的样品。
　　3.2 试验样品 working sample
　　在实验室中从送检样品中分出的部分样品，供测定某一检验项目之用。
　　4 检验内容和方法
　　4.1 感官检验
　　4.1.1 母种
　　4.1.1.1 容器
　　用米尺测量试管外径和管底至管口的长度，肉眼观察试管有无破损。
　　4.1.1.2 棉塞(无棉塑料盖)
　　手触是否于燥；肉眼观察是否洁净，对着光源仔细观察是否有粉状物；松紧度以手提起棉塞或拔岀棉塞的状况检査；棉塞透气性和滤菌性以观察塞入试管口内或露出试管口外棉塞的长度检査。
　　4.1.1.3 斜面长度
　　用米尺测量斜面顶端到棉塞的距离。
　　4.1.1.4 斜面背面外观
　　肉眼观察培养基边缘是否与试管壁分离，同时观察培养基的颜色。
　　4.1.1.5 母种外观其他各项
　　肉眼观察菌丝有无其他色泽及异常，有无螨类，必要时用5倍放大镜观察。
　　4.1.1.6 气味
　　在无菌条件下拔出棉塞，将试管口置于距鼻5cm~l0cm处，屏住呼吸，用清洗干净、酒精棉球擦拭过的手在试管口上方轻轻煽动，顺风鼻闻。
　　4.1.2 原种和栽培种
　　4.1.2.1 容器
　　肉眼观察有无破损。
　　4.1.2.2 棉塞(无棉塑料盖)
　　按照4.1.1.2的要求。
　　4.1.2.3 培养基上表面距瓶(袋)口的距离
　　用米尺测量。
　　4.1.2.4 接种量
　　原种用米尺测量接种块大小，栽培种检查生产记录。
　　4.1.2.5 杂菌菌落
　　肉眼观察，必要时用5倍放大镜观察。
　　4.1.2.6 菌种外观其他各项
　　肉眼观察菌丝有无其他色泽及异常，有无螨类，必要时用5倍放大镜观察。
　　4.1.2.7 气味
　　按照4.1.1.6的要求。
　　4.2 菌丝微观特征检验
　　4.2.1 插片培养法
　　挑取试验样品中少量菌丝分别接种于2个PDA平板上，25℃培养3d，在菌落边缘处插入无菌盖片，继续在25℃下培养2d~3d，取出盖片，盖于载玻片的水滴上，显微镜下观察。先用10倍物镜观察菌丝是否粗壮、丰满、均匀，再转到40倍物镜下观察菌丝的细微结构。需要测量菌丝粗细的可在目镜内装好测微尺，对菌丝直径进行测量。同时观察有无锁状联合、形态结构和特征。每一试检样品应检查不少于30个视野。
　　4.2.2 水封片观察法
　　取干净载玻片，滴一滴无菌水，用无菌操作方法挑取试验样品中少量菌丝于水滴中，挑散菌丝，盖上盖玻片，先用10倍物镜观察菌丝是否粗壮、丰满、均匀，再转到40倍物镜下观察菌丝的细微结构。需要测量菌丝粗细的可在目镜内装好测微尺，对菌丝直径进行测量。同时观察有无锁状联合、形态结构和特征。每一试检样品应检查不少于30个视野。
　　4.3 霉菌检验
　　从试验样品中挑出3mm×3mm~5mm×5mm大小的菌种块，在无菌条件下接种于PDA培养基上，置于25℃~28℃温度下培养，5d~7d后取出，在光线充足的条件下对比观察。检查菌落是否外观均匀、边沿整齐，是否具有该菌种的固有色泽；有无绿黑、黄、红、灰等颜色的粉状分生孢子或异常。