SN/T 3382-2012 出口乳与乳制品中非蛋白氮含量检测标准

　　1 范围
　　本标准规定了乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定方法。
　　本标准适用于鲜奶、乳粉中非蛋白氮含量的测定。
　　2 规范性引用文件
　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
　　GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备
　　GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准滴定溶液的制备
　　GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定
　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
　　3 术语和定义
　　下列术语和定义适用于本文件。
　　非蛋白氮含量 non-protein-nitrogen content
　　蛋白质以外氮的含量。
　　4 方法提要
　　用丙酮沉淀乳蛋白，滤液水浴浓缩近干，经消化、蒸馏后用0.05mol/L硫酸滴定，计算非蛋氮含量。
　　5 试剂和材料
　　除另有规定外，所用试剂均为分析纯。
　　5.1 水：GB/T682规定的一级水。
　　5.2 丙酮。
　　5.3 硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
　　5.4 硫酸钾(K2SO4)。
　　5.5 硫酸(H2SO4密度为1.84g/L)。
　　5.6 硼酸(H3BO3)。
　　5.7 甲基红指示剂(C15H15N3O2)。
　　5.8 溴甲酚绿指示剂(C21H14Br4O5S)。
　　5.9 亚甲基蓝指示剂(C16H18CIN3S·3H2O)。
　　5.10 氢氧化钠(NaOH)。
　　5.11 95%乙醇(C2H5OH)。
　　5.12 硼酸溶液(20g/L)：称取20g硼酸，加水溶解后并稀释至1000mL。
　　5.13 氢氧化钠溶液(400g/L)：称取40g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL。
　　5.14 硫酸标准滴定溶液(0.05mol/L)：按GB/T 602 配制和标定。
　　5.15 甲基红乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
　　5.16 亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
　　5.17 溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
　　5.18 混合指示液：2份甲基红乙醇溶液(5.15)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(5.16)临用时混合。也可用1份甲基红乙醇溶液(5.15)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(5.15)临用时混合。
　　5.19 滤纸：中速定性滤纸。
　　6 仪器和设备
　　6.1 分析天平：感量为0.1mg。
　　6.2 定氮仪。
　　6.3 具塞离心管：50mL。
　　6.4 滴定管：10mL。
　　7 试样制备与保存
　　试样混合均匀装入洁净的容器内，冷藏在0℃~4℃冰箱中。试样应在试验前预先取出，并升至室温。
　　8 分析步骤
　　8.1 试样处理
　　准确称取混匀的固体样品试样约1g，液体样品约10g，*至0.001g，置于离心管中，固体样品中加入10mL水，溶解混匀。试样加入40mL的丙酮溶液(5.2)，混匀，静置5min，用滤纸滤至定氮瓶中，加入微量硫酸保持溶液呈酸性，沸水浴浓缩近干。向定氮瓶中加亼0.2g硫酸铜(5.3、6g硫酸钾(5.4)及20mL硫酸(5.5)，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°斜支于小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部碳化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热0.5h~1h取下冷却，小心加入20mL水，进行定氮蒸馏。
　　8.2 测定
　　按GB 5009.5 *法规定执行，定氮蒸馏后，用0.05mol/L硫酸标准滴定溶液进行滴定。
　　8.3 空白实验
　　除不加试样外，按上述步骤操作。
　　9 结果计算
　　9.1 试样中非蛋白氮的含量按式(1)计算：
　　X——试样中非蛋白氮的含量，%；
　　V1——试样消耗硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；
　　V0——空白消耗硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；
　　c——硫酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
　　0.0140——1.0mL硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L或盐酸[c(HCl)=1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克(g)；
　　m——试样质量，单位为克(g)。
　　9.2 扣除试剂空白的测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
　　10 精密度
　　在重复性条件下获得的两次独立测定结果的*差值不得超过算术平均值的10%。