SN/T 1499-2004 化妆品中曲酸的检测方法 液相色谱法检测标准

　　1 范围
　　本标准规定了化妆品中曲酸的液相色谱检测方法。
　　本标准适用于化妆品中曲酸的检测。
　　2 原理
　　化妆品中的曲酸用水提取，过滤后，采用反相高效液相色谱技术进行分离、测定。根据其保留时间定性，标准工作曲线法定量
　　3 试剂和材料
　　除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为二次去离子水。
　　3.1 甲醇：色谱纯。
　　3.2 磷酸二氢钾：0.02mol/L
　　3.3 曲酸：纯度≥99%；
　　3.4 曲酸标准储备液(200mg/L)：称取0.02g曲酸，*到0.1mg，于50mL烧杯中，加适量水溶解，溶液定量移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。
　　4 仪器
　　4.1 液相色谱仪，配有紫外检测器。
　　4.2 微量进样器，10L。
　　4.3 超声波清洗器
　　4.4 离心机，12000r/min。
　　4.5 溶剂过滤器和0.45m过滤膜。
　　5 测定步骤
　　5.1 试样的处理
　　称取化妆品试样约0.5g，*到1mg，于50mL具塞锥形瓶中，加入20mL水，在超声波清洗器中超声震荡20min，将溶液移人50mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。取部分溶液放入离心管中，在离心机上于12000r/min离心10min，离心后的上清液经0.45m滤膜过滤，滤液待测定用。
　　5.2 测定
　　5.2.1 色谱条件
　　5.2.1.1 色谱柱：ODsC8柱[250mm×4.6mm(内径)，5m，或相当者]。
　　5.2.1.2 流动相：甲醇：0.02mol/L磷酸二氢钾=18：82(体积分数)。
　　5.2.1.3 流速：1.0mL/min；
　　5.2.1.4 检测波长：273mm；
　　5.2.1.5 柱温：室温；
　　5.2.1.6 进样量：10μL。
　　5.2.2 标准工作曲线绘制
　　准确移取曲酸标准储备液0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL到系列10mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。取10μL溶液注入液相色谱仪进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准溶液色谱图参见附录A。
　　5.2.3 试样的测定
　　用微量进样器准确吸取10μL试样溶液(5.1)注入液相色谱仪进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积。以其保留时间定性，峰面积定量。曲酸含量高的试样可取适当试样溶液用水稀释后进行测定。
　　6 结果计算
　　结果按式(1)计算，计算结果表示到小数点后两位。
　　W=c.V/1000m*100      (1)
　　式中:
　　W——化妆品中曲酸的含量，%；
　　c——从标准工作曲线上查出的试样溶液中曲酸的浓度，单位为毫克每升(mg/L)；
　　V——试样溶液定容体积，单位为升(L)；
　　m——试样的质量的数值，单位为克(g)。
　　7 回收率和测定低限
　　7.1 回收率的实验数据
　　曲酸浓度在0.02%~3.00%范围，回收率在98.50%~116.4%之间。
　　7.2 测定低限
　　本方法对曲酸的测定低限为0.005%。
　　8 精密度
　　曲酸含量在0.02%，测定结果(n=6)间的相对标准偏差为0.28%；
　　曲酸含量在0.50%，测定结果(n=6)间的相对标准偏差为3.14%；
　　曲酸含量在1.00%，测定结果(n=6)间的相对标准偏差为2.58%；
　　曲酸含量在2.00%，测定结果(n=6)间的相对标准偏差为3.10‰。